Вакуумные пробирки UNIVAC для исследования сыворотки с активатором свертывания крови (кремнезем) и р

Информация о наполнителях и особенности преаналитического этапа при выполнении лабораторных исследований с использованием сыворотки крови

Сыворотка крови — наиболее часто используемый материал в КДЛ. Для получения сыворотки кровь должна полностью свернуться с образованием консолидированного сгустка. У пациентов, не принимающих антикоагулянты, кровь в пробирке свертывается в течение часа. Отделение сгустка от сыворотки происходит при центрифугировании. Если же кровь свернулась не полностью, то оставшийся после центрифугирования фибрин может изменять оптическую плотность пробы, а также засорять зонды анализаторов.

Для ускорения процесса коагуляции используются активаторы свертывания. В стеклянных пробирках функцию активатора свертывания выполняет непосредственно сама стеклянная стенка пробирки. Контакт крови со стеклом активно запускает процесс свертывания крови. Поверхность пластика является инертной, поэтому для запуска процесса коагуляции добавляются активаторы свертывания: кремнезем и/или тромбин.

Кремнезем (диоксид кремния - SiO₂) нанесен на внутреннюю поверхность вакуумной пробирки в виде мелкодисперсных частиц. Кремнезем химически инертен, нерастворим в воде и устойчив к действию ферментов.

Кремнезем  активирует процесс свертывания крови, действуя на тромбоцитарное звено (происходит адгезия тромбоцитов к частичкам кремнезема и запускается процесс активации тромбоцитов, следствием которого является выброс тромбоцитарных факторов свертывания) и плазменное звено (активируется XII фактор и запускается внутренний путь свертывая крови).

Помимо активатора свертывания пробирки данной серии содержат полиэфирный гель – специальный материал, предназначенный для образования стойкого барьера между клетками крови и сывороткой в результате центрифугирования. Удельный вес геля меньше удельного веса кровяного сгустка, поэтому при центрифугировании кровяной сгусток с нитями фибрина опускаются на дно пробирки под разделительный гель. В то же время, поскольку удельный вес геля больше удельного веса сыворотки крови, гель не всплывает над сывороткой.

Образовавшийся в процессе центрифугирования гелевый барьер обеспечивает стабильность состава сыворотки, что позволяет транспортировать и длительно хранить пробу в первичной вакуумной пробирке, избавляя от необходимости декантирования сыворотки и использования вторичных пробирок при транспортировке и исследовании пробы.

ВАЖНО! После взятия пробы крови в вакуумную пробирку с кремнеземом и гелем, ее следует перемешать путем плавного переворачивания 5–6 раз для лучшего распределения кремнезема во всем объеме крови. Ни в коем случае нельзя встряхивать пробирку крови резкими движениями, поскольку это приведет к частичному лизису эритроцитов и образованию гемолизированной сыворотки, непригодной для выполнения лабораторных исследований.

Условия центрифугирования

При использовании пробирок с гелем также очень важно соблюдать корректные условия центрифугирования: 2500-3000g / 10-15 мин / 25°С. Если величина центробежного ускорения (g) меньше, чем необходимо, гель не поднимется по стенкам пробирки и не будет выполнять роль разделительного элемента, а если g больше, чем необходимо, то могут повреждаться клетки, что также скажется на результатах анализа.

Пробирки с разделительным гелем следует центрифугировать не позднее, чем через 2 часа после взятия крови. Для центрифугирования пробирок данного типа рекомендуется использовать центрифуги с горизонтальным ротором. В центрифугах с горизонтальным ротором образуется более стабильный гелевый барьер, чем в центрифугах с фиксированным углом наклона. Когда гелевый барьер уже сформировался, пробирки не следует центрифугировать повторно. Поскольку в некоторых случаях это может приводить к разрушению эритроцитов и попаданию гемоглобина в фракцию сыворотки. 

Условия хранения и транспортировки образцов сыворотки

Отцентрифугированные образцы крови в первичных пробирках с разделительным гелем можно хранить в течение 2-3 дней в холодильнике (от +2°С до +4°С), транспортировать в контейнере с хладагентом и замораживать (при -20°С). Замораживание образцов крови в пробирках с гелем производится следующим образом: пробирки расставляются в штатив в вертикальном положении, с достаточным интервалом (для обеспечения циркуляции воздуха между ними). Затем пробирки охлаждаются до +4 °С в течение 2 ч, и после этого производится замораживание со скоростью –0,5 °С/мин до –20 °С.

Преимущества вакуумных пробирок с гелем:

• сокращается время проведения анализа (нет необходимости ждать 1 час для завершения образования сгустка);
• «выход» сыворотки при центрифугировании больше (особенно это важно в педиатрии);
• центрифугировать надо только один раз;
• снижается вероятность гемолиза при центрифугировании;
• после центрифугирования пробу можно спокойно транспортировать без отделения от кровяного сгустка;
• возможно проведение анализа в первичной пробирке;
• можно переливать сыворотку в другие пробирки без применения пипеток;
• пробирки можно замораживать при температуре до -20°С.

В силу приведенных преимуществ при централизации лабораторных исследований предпочтительно использование именно вакуумные пробирки с гелем.